Определение этоксидола в плазме крови человека методом микроэмульсионной жидкостной хроматографии

  • Андрей Владимирович Пирогов Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова, Москва, Россия
  • Елена Борисовна Пашкова ООО «Бион», Обнинск, Россия
  • Михаил Васильевич Попик Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова, Москва, Россия
  • Олег Алексеевич Шпигун Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова, Москва, Россия
Ключевые слова: этоксидол, микроэмульсионная жидкостная хроматография

Аннотация

Одним из важнейших направлений развития фармакологической науки является разработка и внедрение в клиническую практику лекарственных средств природного и синтетического происхождения. Ярким представителем отечественных цитопротекторов является яблочнокислая соль
3-гидрокси-6-метил-2-этилпиридина, запатентованная под торговым названием «Этоксидол». Он не уступает, а иногда и превосходит аналогичные препараты по своей фармакологической активности. В литературе найдена только одна работа, посвященная определению этоксидола в лекарственных препаратах методом вольтамперометрии. Для его определения в плазме крови чувствительность недостаточна. Необходимо было разработать более чувствительный и селективный способ.

Микроэмульсии часто используют в вариантах капиллярной электрокинетической хроматографии или пробоподготовке, но метод микроэмульсионной жидкостной хроматографии (МЭЖХ) столь широкого распространения не получил. Метод обладает определенными преимуществами перед ВЭЖХ. В данной работе осуществлено определение этоксидола в плазме крови методом высокоэффективной микроэмульсионной хроматографии с флуориметрическим детектированием. К 300 мм3 плазмы добавляли 300 мм3 микроэмульсии и тщательно перемешивали для осаждения белков плазмы. Добавление микроэмульсии позволяет предотвратить соосаждение этоксидола вместе с белками. Надосадочную жидкость отбирали и вводили в хроматограф. Степень извлечения контролировали хроматографически путем добавок известного количества этоксидола в экстракт из холостой плазмы.

В мицеллярной среде вещества могут сольватироваться иначе, чем в водно-метанольных/ацетонитрильных растворах. Изменения в спектральных характеристиках веществ вызваны наличием в составе микроэмульсии масла, внедрение веществ в каплю которого приводит к спектральному сдвигу. При определении этоксидола выбраны длины волн возбуждения и детектирования λex 287 нм и λem 399 нм соответственно. Следует отдельно подчеркнуть, что микроэмульсия дополнительно позволяет стабилизировать определяемые компоненты. Так, в случае определения этоксидола в плазме крови стандартные способы пробоподготовки (жидкостная и твердофазная экстракция, осаждение белков органическими растворителями, кислотами, ионами металлов) не привели к необходимому результату. В случае разбавления образца микроэмульсией извлечение было количественным.

Калибровочная зависимость носила линейный характер в диапазоне концентраций 0.1-10 мг/дм3. График описывается линейным уравнением S=23.97C-1.257. Коэффициент корреляции R2=0.998. Предел обнаружения 50 мкг/дм3. Относительное стандартное отклонение S(r) составляет 0.08 (n=3). Таким образом, предложен новый хроматографический метод определения этоксидола в плазме крови человека. Показано, что использование микроэмульсии в качестве элюента приводит к стабилизации препарата в растворах и значительному увеличению извлечения этоксидола из реальных образцов.

Скачивания

Данные скачивания пока не доступны.

Биографии авторов

Андрей Владимирович Пирогов, Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова, Москва, Россия

д.х.н., профессор, заведующий лабораторией хроматографии химического факультета Московского государственного университета имени М.В. Ломоносова, Москва, Россия

Елена Борисовна Пашкова, ООО «Бион», Обнинск, Россия

к.х.н., ведущий научный сотрудник по методической работе отдела разработок ООО «Бион», Обнинск, Россия

Михаил Васильевич Попик, Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова, Москва, Россия

к.х.н., ведущий научный сотрудник химического факультета Московского государственного университета имени М.В. Ломоносова, Москва, Россия

Олег Алексеевич Шпигун, Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова, Москва, Россия

член-корр. РАН, д.х.н., профессор кафедры аналитической химии, Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, химический факультет, Москва, Россия

Литература

Ziyatdinova G.K., Budnikov G.K. Determination of mexidol. Pharm.Chem.J. 2005; 39(8): 447-448.

Berthod A., Laserna J.J., Carretero I. Oil-In-Water Microemulsions as Mobile Phases for Rapid Screening of Illegal Drugs in Sports. J. Liq. Chromatogr. & Relat. Technol. 1992; 15(17): 3115-3127.

Marsh A., Clark B.J., Altria K.D. Oil-in-water microemulsion LC determination of pharmaxeuticals using gradient elution. Chromatographia. 2005; 61: 539-547.

Buchberger, W. Microemulsion Electrokinetic Chromatography. In: Schmitt-Kopplin, P. (eds) Capillary Electrophoresis. Methods in Molecular Biology. 2016. Humana Press, New York, NY. 1483: 91-109.

Kartsova L.A., Solov'eva S.A., Bessonova E.A. Mikroemul'sionnoe koncentrirovanie steroidnyh gormonov iz vodnyh rastvorov i obrazcov mochi. ZHurnal analit. himii. 2021; 76(9): 804-811. (In Russ.)

Mahuzier P-E., Clark B.J., Bryant S.M., Altria K.D. High-speed microemulsion electrokinetic chromatography. Electrophoresis. 2001; 22(17): 3819-3823.

Pirogov A.V., SHpigun O.A. Primenenie mikroemul'sij v zhidkostnoj hromatografii i elektrokineticheskih metodah analiza. Dostoinstva i nedostatki podhoda. ZHurnal analit. himii. 2020; 75(2): 99-108. (In Russ.)

Pirogov A.V., Sokolova L.S., Sokerina E.S., Taturova O.G., Shpigun O.A. Determination of flavonoids as complexes with Al3+ in microemulsion media by HPLC method with fluorescence detection. J. Liq. Chromatogr. & Relat. Technol. 2016; 39(4): 220-224.

Kargin I.D., Sokolova L.S., Pirogov A.V., SHpigun O.A. // Opredelenie antibiotikov tetraciklinovogo ryada v moloke metodom vysokoeffektivnoj zhidkostnoj hromatografii s poslekolonochnoj reakciej i fluorimetricheskim detektirovaniem. Zavodskaya laboratoriya. 2015; 81(2): 5-9. (In Russ.)

Опубликован
2023-10-29
Как цитировать
Пирогов, А. В., Пашкова, Е. Б., Попик, М. В., & Шпигун, О. А. (2023). Определение этоксидола в плазме крови человека методом микроэмульсионной жидкостной хроматографии. Сорбционные и хроматографические процессы, 23(4), 570-577. https://doi.org/10.17308/sorpchrom.2023.23/11566

Наиболее читаемые статьи этого автора (авторов)