Иммобилизация пирогаллолового красного желатиновым гелем и использование композита для определения общего белка

  • З. А. Темердашев д.х.н., профессор, зав. кафедрой аналитической химии Кубанского государственного университета, Краснодар
  • П. В. Анисимович аспирант факультета химии и высоких технологий Кубанского государственного университета, Краснодар
  • Т. Б. Починок к.х.н. доцент, доцент кафедры аналитической химии Кубанского государственного университета, Краснодар
  • Е. А. Решетняк к.х.н., доцент, доцент кафедры химической метрологии Харьковского национального университета имени В.Н. Каразина, Харьков
Ключевые слова: пирогаллоловый красный, сорбция, желатин, индикаторная пленка, общий белок, альбумин, глобулин, сорбционно-спектроскопический метод анализа.

Аннотация

Изучена возможность использования для спектрофотометрического определения белка в
биологических жидкостях твердофазного реагента на основе отвержденного желатинового геля,
модифицированного пирогаллоловым красным (ПГК). Исследованы поведение ПГК и
закономерности сорбции красителя в отвержденный желатиновый гель, изучен характер изменения
кислотных свойств реагента при его переходе из раствора в слой желатинового геля.
Оптимизированы условия взаимодействия иммобилизованного в желатиновый гель ПГК с
белком: подобрана концентрация реагента в исходном растворе, время контакта модифицированных
желатиновых пленок с раствором белка, состав сукцинатного буфера. Разработана методика
сорбционно-спектроскопического определения общего белка в биологических жидкостях,
позволяющая детектировать аналит в биологических жидкостях в диапазоне концентраций 7·10
-3
до
7·10
-2
г/л с пределом обнаружения 6·10
-3
г/л. Проведена проверка правильности определения белка на
модельных растворах и реальных объектах.

Скачивания

Данные скачивания пока не доступны.

Литература

1.Pupkova V.I., Prasolova L.M. Opredelenie
belka v moche i spinnomozgovoi zhidkosti:
Informatsionno-metodicheskoe posobie [Protein
determination in urine and cerebrospinal fluid.
Workbook] Kol'tsovo, 2007. 43 p.
Анисимович и др. / Сорбционные и хроматографические процессы. 2015. Т. 15. Вып. 2
232
2.Laricheva E.S., Andreev Yu.N., Kozlov
A.V. Sposoben li metod opredeleniya belka v
moche pirogallolovym krasnym pretendovat' na
rol' osnovnogo? [Can method of protein
determination in urine with pyrogallol red be a
main?], Laboratornaya diagnostika, 2009, No 1,
pp. 24-31.
3.Nazarenko G.I., Kishkun A.A.
Klinicheskaya otsenka rezul'tatov laboratornykh
issledovanii [Clinical assessment of laboratory
research results], M.: Meditsina, 2000, 554 p.
4.Men'shikov V.V. Metodiki klinicheskikh
laboratornykh issledovanii. Tom III.
Klinicheskaya mikrobiologiya [Methods of
clinical laboratory researches. Volume III.
Clinical microbiology], M.: Labora, 2009.
880 p.
5.Kim Yu.V., Potekhin O.E., Tokar M.I. et al.
Chto my izmeryaem v moche sul'fosalitsilovym
metodom? [What do we measure in urine with
sulfosalicylic method?], Laboratornaya
meditsina, 2003, No. 6, pp. 94-98.
6.Shibanov A.N. Ofitsial'nyi sait kompanii
«Yunimed AO» http://www.unimedao.ru
/articles/6826/9674. Data obrashcheniya:
14.01.2015.
7.Bradford M.M. Rapid and sensitive method
for the quantitation of microgram quantitaon of
protein utilizing the principle of protein-dye
binding, Anal. Biochem., 1976, Vol. 72, pp. 248
– 254.
8.Strelets E.V., Egorova E.N. Sposob
kolichestvennogo opredeleniya mutsina [The
method of mucin quantitative determination],
Patent RF № 2250465, opubl. 20.04.2005.
9.Instruktsiya po primeneniyu nabora
reagentov dlya opredeleniya soderzhaniya
al'bumina v syvorotke i plazme krovi cheloveka
AL''BUMIN FS [Application instruction for
reagent set for detemination of albumin content
in serum and blood plasma. ALBUMIN FS.],
Utverzhdena Prikazom Roszdravnadzora ot 15
aprelya 2009 g. № 3004 – Pr,09 RU № FSR
2009/04712 ot 06.02.2009 g.
10. Fujita Y., Mori I., Kitano S. Color
reaction between Pyrogallol Red −
molybdenium (VI) complex and protein,
Bunseki Kagaku, 1983, Vol. 32, pp. 379-386.
11. Watanabe N. Kamei S., Ohkubo A. et al.
Urinary protein as measured with a pyrogallol
red-molybdate complex manually and in a
Hitachi 726 automated analyzer, Clin. Chem,
1986, Vol. 32, pp. 1551-1554.
12. J.L. Orsonneau, P. Douet, C. Massoubre
et al. An improved pyrogallol red-molybdate
method for the determining total urinary
protein, Clin. Chem., 1989, Vol. 35,
pp. 2233–2236.
13. Reshetnyak E.A., Ivchenko N.V., Nikitina
N.A. et al. Indikatornye plenki na osnove
otverzhdennogo zhelatinovogo gelya s
immobilizovannymi metalloindikatorami
[Indicator films on the basis of gelatin gel with
immobilized metal indicators], Metody i
ob"ekty khimicheskogo analiza, 2012, Vol. 7,
No 4, pp. 192-201.
14. Temerdashev Z.A., Pochinok T.B.,
Tarasova P.V. et al.Issledovanie immobilizatsii
brompirogallolovogo krasnogo v zhelatinovuyu
matritsu i otsenka vozmozhnosti sozdaniya na
ee osnove opticheski prozrachnogo sensora dlya
opredeleniya metallov [Study of immobilization
of brompirogallolic red in the gelatious matrix
and evaluation the ability to create on its basis
an optically transparent sensor for determination
of metals], Analitika i kontrol', 2012, Vol. 16,
No 1, pp. 39-45.
15. Suk V. Chemische indikatoren VI.
Saurebasische eigenschaften von pyrogallol –
und brompyrogallolred, Collect. Czechoslov.
Chem. Commun., 1966, Vol. 31, No 8, p.3127.
16. Ivanov V.M., Mamedova A.M. 3,4,5-
trigidroksifluorony kak analiticheskie reagent
[3,4,5-Trigidroksifluorony as analytical
reagents], Zhurnal analiticheskoi khimii, 2006,
Vol. 61, No 11, pp. 1128-1151.
17. Shibanov A.N., Svistov A.E., Kim Yu.V.
et al. Sposob kolichestvennogo opredeleniya
belka v biologicheskikh zhidkostyakh [The
method of protein quantitative determination in
biological fluids], Patent RF № 2268476,
zayavl. 30.03.2004; opubl. 20.01.2006.
18. Instruktsiya RU №FSR 2007/01435 po
primeneniyu nabora reagentov dlya
kolichestvennogo opredeleniya obshchego
belka v moche i spinnomozgovoi zhidkosti s
pirogallolovym krasnym (OBSHCHII BELOK
PGK FS) [Application instruction for reagent
set for detemination of total protein in urine and
cerebrospinal fluid with pyrogallol red (TOTAL
PROTEIN PGK FS)], Utverzhdena Prikazom
Roszdravnadzora ot 20 iyulya 2010 g. №
6830Pr,10.
Опубликован
2018-02-19
Как цитировать
Темердашев, З. А., Анисимович, П. В., Починок, Т. Б., & Решетняк, Е. А. (2018). Иммобилизация пирогаллолового красного желатиновым гелем и использование композита для определения общего белка. Сорбционные и хроматографические процессы, 15(2), 223-233. https://doi.org/10.17308/sorpchrom.2015.15/270