Разделение изоформ L-лактатдегидрогеназы из галоалкалофильной бактерии Rhodovulum steppense штамма A-20s методом ионообменной хроматографии
Аннотация
В результате многостадийной очистки, включающей гель-фильтрацию на сефадексе G-25 и ионообменную хроматографию на носителе DEAE-Sephacel, были получены ферментные препараты двух изоформ лактатдегидрогеназы (КФ 1.1.1.27) из галоалкалофильных бактерий Rhodovulum steppense штамма A-20s. При этом удельная активность изоформ составила 4.286 и 5.23 Е/мг белка соответственно. Относительная электрофоретическая подвижность в полиакриламидном геле каждой из изоформ лактатдегидрогеназы равнялась 0.329 и 0.714 соответственно. Определено для одной из изоформ значение константы Михаэлиса по NADH (0.014 мМ). Оптимальная для активности этой изоформы данного фермента область значений рН находится в районе 7.5.
Скачивания
Литература
2.Eprintsev A.T., Falaleeva M.I., Stepanova I.Yu., Parfenova N.V., Biochemistry, 2003, Vol. 68, No 2, pp. 20-21.
3.Eprintsev A.T., Falaleeva M.I., Stepanova I.Yu. et al., Biology Bulletin, 2003, No 3, pp. 301-310.
4. Selemenev V.F., Rudakov O.B., Slavinskaya G.I., Drozdov N.V., Pigmentyi pischevyih proizvodstv, M.: DeLee print, 2008, 246 p.
5.Ostendorp R., Auerbach G., Jaenicke R., Protein Sci., 1996. pp. 862-873.
6.Taguchi H., Machida M., Matsuzawa H., Otha T., Agric Biol Chem., 1985, Vol. 49, pp. 359-365.
7.Flores H., Ellington A.D., Protein Eng. Des. Sel, 2005, Vol. 18, pp. 369-377.
8.Garvie E.I., Microbiol Rev, 2007, Vol. 44, No 1, pp. 106-39.
9.Caspar P., Neves A.R., Shearman C.A. et al., FEBS J., 2007, Vol. 274, No 22, pp. 5924-36.