Методологические аспекты определения оксимов стероидных гормонов методом УВЭЖХ-МСВР

  • Екатерина Владимировна Дмитриева Кубанский государственный университет, Крас-нодар
  • Азамат Зауалевич Темердашев Кубанский государственный университет, Краснодар
  • Алиса Андреевна Азарян Кубанский государственный университет, Краснодар
Ключевые слова: стероидные гормоны, дериватизация, гидроксиламин, определение

Аннотация

Рассмотрены методологические аспекты применения дериватизации стероидных гормонов с использованием гидроксиламина для дальнейшего количественного анализа производных андрогенов, эстрогенов, прогестинов и глюкокортикоидов. Известно, что его использование позволяет значительно увеличить чувствительность масс-спектрометрического детектирования некоторых стероидных гормонов ввиду образования легко ионизирующихся оксимов стероидов, а реакция получения производных является простой.

Однако наряду с перечисленными достоинствами, при использовании данного способа происходит образование стереоизомеров, что приводит к расщеплению или полному разделению пиков дериватов на хроматограммах. Изменение программы градиентного элюирования не всегда позволяет получить один пик деривата без потери эффективности и селективности разделения остальных аналитов, присутствующих в пробе, что делает актуальным вопрос выбора «мишени» для анализа. Принимая во внимание наличие выраженных матричных эффектов при проведении определения стероидных гормонов и их производных в биологических жидкостях с использованием метода ВЭЖХ-МС(/МС) с электрораспылительной ионизацией, подобное поведение веществ при их хроматографическом разделении может быть использовано для повышения точности и надежности получаемых результатов благодаря интегрированию не всех пиков дериватов, а путем выбора одного, наименее подверженного матричным эффектам, обусловленным, например, коэлюированием компонентов пробы. Это связано с тем, что в процессе протекания реакции формирование их изоформ происходит воспроизводимо, с одинаковым выходом, независимо от концентраций и матрицы, в которой протекает процесс.

Приведены результаты определения некоторых оксимов стероидных гормонов, рассмотрены аспекты, влияющие на точность, воспроизводимость и чувствительность анализа на примере определения оксимов эстрона и 11α-гидроксипрогестерона в диапазоне концентраций от 2.5 до 1000 нг/см3. Идентификация производных и контроль полноты протекания реакции проводили с использованием стандартных образцов исследуемых соединений и масс-спектрометрии высокого разрешения. Показано, что данная процедура дериватизации позволяет добиться значительно большей чувствительности по сравнению с подходами, основывающимися на прямом определении стероидных гормонов с использованием ВЭЖХ-МС(/МС). В случае необходимости чувствительность может быть повышена путем применения методов предварительного концентрирования и очистки образцов.

Скачивания

Данные скачивания пока не доступны.

Биографии авторов

Екатерина Владимировна Дмитриева, Кубанский государственный университет, Крас-нодар

аспирант кафедры аналитической химии, Кубанский государственный университет, Краснодар

Азамат Зауалевич Темердашев , Кубанский государственный университет, Краснодар

к.х.н., доцент кафедры аналитической химии, Кубанский государственный университет, Краснодар

Алиса Андреевна Азарян , Кубанский государственный университет, Краснодар

к.х.н., старший преподаватель кафедры аналитической химии, Кубанский государственный университет

Литература

Whirledge S., Cidlowski J.A., Physiology, Pathophysiology, and Clinical Management, 8th ed., Elsiver, 2019, Vol. 5, pp. 115-131. DOI: 10.1016/B978-0-323-47912-7.00005-6.

Cook-Botelho J.C., Bachmann L., French D., Mass Spectrometry for the Clinical Laboratory, Academic Press, 2017, Vol. 10, pp. 205-230. DOI: 10.1016/B978-0-12-800871-3.00010-9.

Keski-Rahkonen P., Huhtinen K., Poutanen M., Auriola S., J. Steroid. Biochem. Mol. Biol., 2011, Vol. 127(3-5), pp. 396-404. DOI: 10.1016/j.jsbmb.2011.06.006.

Kushnir M.M., Blamires T., Rockwood A.L., Roberts W.L. et al., Clin. Chem., 2010, Vol. 56(7), pp. 1138-1147. DOI: 10.1373/clinchem.2010.143222.

Liu Q., Chi Q., Fan R.-T., Tian H.-D. et al., Nat. Prod. Bioprospect., 2019, Vol. 9(3), pp. 201-208. DOI: 10.1007/s13659-019-0204-3.

Kushnir M.M., Rockwood A.L., Bergquist J., Varshavsky M. et al., Am. J. Clin. Pathol., 2008, Vol. 129(4), pp. 530-539. DOI: 10.1309/LC03BHQ5XJPJYEKG.

Kushnir M.M., Rockwood A.L., Roberts W.L., Pattison E.G. et al., Clin. Chem., 2006, Vol. 52(1), pp. 120-128. DOI: 10.1373/clinchem.2005.052167.

Kushnir M.M., Rockwood A.L., Roberts W.L., Pattison E.G. et al., Clin. Chem., 2006, Vol. 52(8), pp. 1559-1567. DOI: 10.1373/clinchem.2006.068445.

Nelson R.E., Grebe S.K., OKane D.J., Singh R.J., Clin Chem., 2004, Vol. 50(2), pp. 373-384. DOI: 10.1373/clinchem.2003.025478.

Опубликован
2021-09-26
Как цитировать
Дмитриева, Е. В., Темердашев , А. З., & Азарян , А. А. (2021). Методологические аспекты определения оксимов стероидных гормонов методом УВЭЖХ-МСВР. Сорбционные и хроматографические процессы, 21(4), 540-546. https://doi.org/10.17308/sorpchrom.2021.21/3638