Респираторная нитратредуктаза из Thiothrix lacustris AS: очистка, физико-химические свойства и каталитические характеристики

  • Ivan V. Trubitsin Трубицин Иван Васильевич — аспирант кафедры биохимии и физиологии клетки биолого-почвенного факультета Воронежского государственного университета, Воронеж
  • Margarita Yu. Grabovich Грабович Маргарита Юрьевна – д.б.н., профессор кафедры биохимии и физиологии клетки биолого-почвенного факультета Воронежского государственного университета, Воронеж
  • Maria N. Tutukina Тутукина Мария Николаевна – к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории функциональной геномики и клеточного стресса Института биофизики клетки РАН, Пущино
Ключевые слова: респираторная нитратредуктаза, Thiothrix lacustris AS, очистка.

Аннотация

Методом многостадийной очистки (гель-фильтрация, ионообменная хроматография и
препаративный электрофорез) из бактерий Thiothrix lacustris AS, выращенных в анаэробных условиях
в присутствии нитратов, получен электрофоретически гомогенный препарат респираторной
нитратредуктазы (К.Ф. 1.7.5.1) с удельной активностью 97,7 Е/мг и степенью очистки в 78 раз. Были
изучены: температурный и рН оптимумы фермента, термостабильность, влияние типичных
ингибиторов, получены величины Km и Vmax.

Скачивания

Данные скачивания пока не доступны.

Литература

1. Blasco F., Iobbi C., Giordano G. et al. Nitrate reductase of Escherichia coli:
completion of the nucleotide sequence of the nar operon and reassessment of the role of
the a and b subunits in iron binding and electron transfer // Mol. Gen. Genet. 1989.
V. 218. P. 249-256.
2. Трубицын И.В., Андреевских Ж.Г., Юревич Л.И. и др. Способность к
нитратному дыханию как новый аспект метаболизма нитчатых серобактерий
рода Thiothrix // Микробиология. 2013. Т. 82. № 1. С. 19-26.
3. Armbruster E.H. Improvedtechniqueforisolationand identification of Sphaerotilus //
Appl. Microbiol. 1969. V. 17. P. 320-321.
4.Pfennig N.D., Lippert K.D. Uber das vitamin B12 – bedurfuisphototropher
Schwefelbakterien // Arch. Microbiol. 1966. V. 55. № 1. P. 245–256.
5. Murillo F.M., Gugliuzzo T., Senco J. et al. A heme C containing enzyme complex that
exhibits nitrate and nitrite reductase activity from the dissimilatory iron_reducing bacterium Geobacter metallireducens // Arch. Microbiol. 1999. V. 172.
P. 313-320.
6. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram
quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding // Analytical Biochem.
1976. V. 72. P. 248-254.
7. Рудаков О.Б., Востров И.А., Федоров С.В. и др. Спутник хроматографиста.
Методы жидкостной хроматографии. Воронеж. Водолей.2004. 528 с.
8. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of
bacteriophage T4 // Nature. 1970. V. 227. P. 680-685.
9. Покусаева В.О., Антипов С.С., Швырева У.С. и др. Суперпродукция, выделение
и очистка функционально активного бактериоферритина Dps E.coli // Сорбционные и
хроматографические процессы. 2012. Т.12. №6. C.1011-1017.
10. Рудакова Л.В., Селеменев В.Ф. Контроль качества и подлинности
фармацевтической продукции с использованием цифровых технологий. В кн.
«Проблемы аналитической химии» T. 16. «Фармацевтический анализ» - М.: Аргамак.
Медиa. 2013. С. 269-308.
11. Zumft W.G. Cell Biology and Molecular Basis of Denitrification // Microbiology
and molecular biology reviews. 1997. V. 61, № 4. P. 533-616.
12. Antipov A.N., Morozkina E.V., Sorokin D.Y. et al.Characterization of Molybdenum-
Free Nitrate Reductase from Haloalkalophilic Bacterium Halomonas sp. Strain AGJ 1-3 //
Biochemistry (Moscow). 2005. V. 70. .№ 7. P. 799-803.
Опубликован
2019-11-19
Как цитировать
Trubitsin, I. V., Grabovich, M. Y., & Tutukina, M. N. (2019). Респираторная нитратредуктаза из Thiothrix lacustris AS: очистка, физико-химические свойства и каталитические характеристики. Сорбционные и хроматографические процессы, 14(2). извлечено от https://journals.vsu.ru/sorpchrom/article/view/1479