Выделение с помощью ионообменной хроматографии ферментативного препарата сукцинатдегидрогеназы из летательных мыщц шмелей Bombus terrestris
Аннотация
Разработан эффективный способ очистки сукцинатдегидрогеназы из митохондрий
летательных мышц самцов шмелей Bombus terrestris. Очистка включала стадии фракционирования
фермента сульфатом аммония из митохондриальной фракции, гель-фильтрации, ионообменной
хроматографии на DEAE-целлюлозе. Фермент очищен до гомогенного состояния. Удельная
активность электрофоретически гомогенного препарата составила 7,14 ед. на 1 мг белка. Фермент
представлен в летательных мышцах одной изоформой. Исследована субстратная специфичность
фермента
Скачивания
Литература
А.Д. Виноградов // Биохимия. − 1986. − Т. 51. − №12. − С. 1944-1973.
2. Singer T.P. Solubilisation assay and purification of succinate dehydrogenase / T.P.
Singer, E.B. Rsarney // Biochem et Biophys. Akta. − 1954. − Vol. 15. − P. 151-153.
3. Cooper T.G. Mitochondria and glyoxysomes from castor bean endosperm. enzyme
constitutents and catalytic capacity / T.G. Cooper, H.J. Beevers // J.Biol. Chem. - 1969. -
Vol. 244. - P. 3507–3513.
4. Protein measurement with the Folin phenol reagent / O.H. Lowry [et al.] // J. Biol.
Chem. –1951. – vol. 193. - №1. – pp. 265-275.
5. Davis B.J. Disc electrophoresis II. Method and aplication to human serum protein /
B.J. Davis // Ann. N. Y. Acad. Sci. - 1994. – Vol. 121. – P. 404-427.
6. Shevchenko A., Wilm M., Vorm O. Mass spectrometric sequncing of protein from
silver-stained polyarylamide gels // Anal. Chem., 1996. V.68. P. 850-858.
7. Гааль, Э., Медьеши Г., Верецкий Л. Электрофорез в разделении биологических
макромолекул. М.: Мир, 1982. 446 с.
8. Ackrell A.C. Effect of membrane environment on succinate dehydrogenase activity /
A.C. Ackrell, E.B. Kearney // The Journal of Biological Chemistry. – 1976 – Vol. 252. -
№5. – P. 1582-1588.
9. Manadori A. (3Fe-4S) to (4Fe-4S) cluster conversion in Escherihia coli fumarate
reductase by site directed mutagenesis / A. Manodori, G. Cecchini, M. K. Jonson //
Biochemistry. – 1992.- Vol.31 - №10. – P. 2703-2712.
10. Holingren E., Hederstedt L. Rufberg L. // J.Bacteriol. 1979. V.138. N 2. P.377-382
11. Hattori T., Asahi T. // Plant and Cell Physiol. 1982. V.23. N 2. P.515-523.
12. Insect biochemistry and function / edited by D. J. Candy and B. A. Kilby 1936