Жидкостная хроматография тромбоцитарных белков

Nikolay I. Gorshkov; Irina I. Malakhova; Oleg S. Zhurlov; Yuriy B. Ivanov; Valeriy D. Krasikov

Nikolay I. Gorshkov Горшков Николай Иванович – к.х.н., с.н.с., Учреждение Российской академии наук Институт высокомолекулярных соединений РАН, С.-Петербург
Irina I. Malakhova Малахова Ирина Ивановна – к.х.н., н.с., Учреждение Российской академии наук Институт высокомолекулярных соединений РАН, С.-Петербург
Oleg S. Zhurlov Журлов Олег Сергеевич – к.б.н., с.н.с., Государственное учреждение Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза УрО РАН, Оренбург
Yuriy B. Ivanov Иванов Юрий Борисович – д.б.н., в.н.с., Государственное учреждение Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза УрО РАН, Оренбург
Valeriy D. Krasikov Красиков Валерий Дмитриевич – д.х.н., в.н.с., Учреждение Российской академии наук Институт высокомолекулярных соединений РАН, С.-Петербург

Ключевые слова: тромбодефенсины, жидкостная хроматография, твердофазная экстракция, низкомолекулярные катионные (анионные) белки.

Аннотация

Тромбоцитарные низкомолекулярные белки (ТНБ)– тромбодефенсины – относятся к
классу антимикробных низкомолекулярных белков, образующихся в результате отклика
иммунной системы большинства организмов на определенные физиологические условия.
Настоящая публикация посвящена разработке новых методов хроматографического выделения,
очистки и анализа ТНБ, полученных из эритроцитарной массы крови человека. Для этих целей
предложена ступенчатая хроматографическая процедура выделения и анализа белков,
включающая в себя ресуспендирование тромбоцитарной массы в ледяной уксусной кислоте при
температуре 258 К с последующим центрифугированием и дальнейшей очисткой методами
твердофазной экстракции (ТФЭ) и обратнофазной высокоэффективной жидкостной
хроматографии. Разработаны методы анализа тромбодефенсинов методами тонкослойной
хроматографии (ТСХ) и высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

Скачивания

Данные скачивания пока не доступны.

Литература

1.Zaat S. A., Hiemstra P. S., Dankert J. Initial characterization of antibacterial proteins
from trombin-simulated platelets involved in clearance of Streptococus sangius from
cardiac vegetation in experimental endocarditis// in A. Totolian (ed.) Pathogenic
streptococci, present and future. 1994. P 473-475
2. Hancock R.E.W., Scott M.G. The role of antimicrobial peptides in animal defenses //
PNAS. – 2000. – Vol.97. – P.8856-8861.
3. Yeaman M. R., Ibrahim A. S., Edwards J. E., Bayer Jr., A. S., Ghannoum M . A.
Trombi-induced rabbit platelet microbicidal proteins is fungicidal in vitro//Antimicrob.
Agents Chemother. 1993. Vol. 37. P. 546-553
4. Shailaja V.V., Himabindu V., Anuradha K. Et al. In vitro activity of gatifloxacin
against gram negative clinical isolates in a tertiary care hospital // Indian J. Mel. Microbiol.
– Vol.22. – P.222-225.
5. Дерябин Д.Г. Стафилококки: экология и патогенность. – Екатернбург: УрО РАН,
2000. – С.174-186.
6. Mosca D.A., Hurst M.A., So W. et al. IB-367, a protegrin peptide with in vitro and in
vivo activities against the microflora associsted with oral mucositis // Antimicrob. Agents
Chemother. – 2000. – Vol.44. – P.1803-1808.
7. Фадеев С.Б. Видовой состав и персистентные характеристики возбудителей
хирургической инфекции мягких тканей. – Автореф. дисс. канд. мед. наук.-
Оренбург, 1998.
8. US Patent 5338724, A 61 K 037/02, 1994.; US Patent 6211148, A 61 K 038/16, 2001.;
US Patent 6008195, C 07 K 007/08, 1999.
9. Yeaman M. R. The role of platelets in antimicrobial host defence // Clin. Infect. Dis. –
1997. – Vol.25. – P.951-968.
10. Kriijsveld J. S., Zaat A. J., Meeldjik J., van Veelen G., Fang, G., Poolman B., Brandt
E.. Trombocidines, microbicibicidal proteins from human blood platelets, are C-terminal
deletion products of CXC chemokines//J. Biol Chem. 2000. Vol. 275. P. 20374-20381
11. Yeaman M. R., Tang Y.-Q., Shen A. J. Bayer A. S., Selsted M. E. Purification and in
vitro activites of rabbit platelet microbicidal proteins// Infect . Immunol.1997. Vol. 65. P. 1023-1031
12. Tang Y.-Q, Yeaman M. R., Selsted M. E. Antimicrobal peptides from human
platelets//Infection and Immunity. 2002. Vol. 70 P. 65-6533