Оптимизация изоляции ДНК из тканей печени крысы c использованием техники, основанной на сорбции нуклеиновых кислот
Аннотация
Для большого числа молекулярно-биологических работ, а также для изучения физико-
химических свойств нуклеиновых кислот, их химических модификаций важную роль играет
способ получения нуклеиновой кислоты, степень чистоты препарата и количество вещества на
выходе. В настоящее время помимо традиционной фенол-хлороформной экстракции широко
используются и другие способы получения нуклеиновых кислот для анализа – магнитные
частицы, хроматографические методы, сорбция кислот на различных носителях. Для наибольшей
репрезентативности и достоверности научных результатов необходимо получить исходный
материал для работы – нуклеиновую кислоту – в максимально интактном виде. Для этого
выбирается наиболее оптимальная методика. В настоящей статье рассматривается эффективность
получения препарата ДНК с применением различных подходов – фенол-хлороформной
экстракции и выделения на кремниевом сорбенте.
Скачивания
Литература
2. Hong Chen, Murugesan Rangasamy, Sek Yee Tan, Haichuan Wang, В. D. Siegfried.
Evaluation of Five Methods for Total DNA Extraction from Western Corn Rootworm
Beetles // PLoS One. 2010. 5(8).
3. Lutz K, Wenqin W., Zdepski А., Michael Т. Isolation and analysis of high quality
nuclear DNA with reduced organellar DNA for plant genome sequencing and resequencing
// BMC Biotechnol. 2011; 11: 54.
4. Bravo D., Clari M., Costa E., Muñoz-Cobo B., Solano C., Remigia M.J., Navarro D.
Comparative Evaluation of Three Automated Systems for DNA Extraction in Conjunction
with Three Commercially Available Real-Time PCR Assays for Quantitation of Plasma
Cytomegalovirus DNAemia in Allogeneic Stem Cell Transplant Recipients // J Clin
Microbiol. 2011. 49(8): 2899–2904.
5. Chomczynski P., Sacchi N.. The single-step method of RNA isolation by acid
guanidinium thiocyanate–phenol–chloroform extraction: twenty-something years on //
Nature protocols. 2006. vol.1. no.2.
6. Rogers S.O., Bendich A. J. Extraction of DNA from milligram amounts of fresh,
herbarium and mummified plant tissues // Plant Molecular Biology. 1985. Vol. 5. 69-76.
7. Kay E., Simmons N., Alexander L. An Improved Preparation of Sodium
Desoxyribonucleate // J. Am. Chem. Soc. 1952. Vol. 74 (7). 1724–1726.