ВЭЖХ анализ аскорбиновой кислоты в биологических жидкостях и некоторых пищевых продуктах

  • Alexei A. Dutov Дутов Алексей Александрович - д.м.н. (клиническая фармакология), врач высшей квалификационной категории (клиническая лабораторная диагностика), с.н.с. лаборатории экспериментальной и клинической биохимии и иммунологии научно-исследовательского института медицинской экологии при Медицинской Академии, Чита
  • Denis A. Nikitin Никитин Денис Александрович - заведующий лабораторией химического анализа Забайкальского государственного университета, Чита
  • Anna M. Akhmetshina Ахметшина Анна Мунирзяновна - аспирант кафедры химии 1-года обучения Забайкальского Государственного Университета
  • Olga M. Akhmetshina Ахметшина Ольга Мунирзяновна - аспирант кафедры химии 1-года обучения Забайкальского Государственного Университета
  • Anastasia V. Martynova Мартынова Анастасия Владимировна - аспирант кафедры химии 1-года обучения Забайкальского Государственного Университета
  • Anna V. Sverkunova Сверкунова Анна Викторовна - аспирант кафедры химии 1-года обучения Забайкальского Государственного Университета
  • Alena V. Yermolina Ермолина Алена Владимировна - врач офтальмолог Краевой больницы № 2
  • Ekaterina N Fedorova Федорова Екатерина Николаевна - аспирант кафедры химии 3-года обучения Забайкальского Государственного Университета
  • Olga N. Konovalova Коновалова Ольга Николаевна, аспирант кафедры химии 3-года обучения Забайкальского Государственного Университета
  • Julia L. Lukyanova Лукьянова Юлия Львовна - врач- ординатор кафедры неврологии Читинской Медицинской Академии
  • Maria N. Mishchenko Мищенко Мария Николаевна - к.м.н., ассистент кафедры терапевтической стоматологии Читинской Медицинской Академии
  • Anastasia N. Semenova Семенова Анастасия Николаевна - аспирант кафедры хирургической стоматологии 3-го года обучения Читинской Медицинской Академии
Ключевые слова: ВЭЖХ, УФ и флюориметрическая детекция, аскорбиновая кислота, плазма, слюна, слезная жидкость, пищевые продукты.

Аннотация

Предложен ВЭЖХ метод определения общей аскорбиновой кислоты в плазме крови, слюне,
слезной жидкости и некоторых пищевых продуктах. Биологические образцы депротеинизировали и
очищали c помощью ацетонитрила и хлороформа. Аскорбиновую кислоту окисляли в
дегидроаскорбиновую с помощью раствора йода. Последующую дериватизацию проводили с помощью
о-фенилендиамина при умеренных условиях (15 мин, 40ОС). Дериваты разделяли обращенно-фазной
(С18) ВЭЖХ с УФ 365 нм и флюориметрической ex365-em412 нм детекцией. Элюент содержал 20%
ацетонитрила и 0.05% трифторуксусной кислоты. Полное разделение достигалось менее чем за 2 мин
при скорости потока 1400 мкл/мин. Простота, воспроизводимость и высокая чувствительность метода,
позволяют использовать его в клинической практике для оценки биохимических изменений при
глазных и стоматологических заболеваниях, а также для измерения концентрации аскорбиновой
кислоты в ягодах, фруктах и соках.

Скачивания

Данные скачивания пока не доступны.

Литература

1. Toshimasa Toyooka. Modern Derivatization Methods for Separation Sciences // John
Wiley & Sons Ltd. – 1999. – 312 p.
2. Margolis S. Ascorbic and Dehydroascorbic Acids Measured in Plasma Preserved with
Dithiothreitol or Metaphosphoric Acid // Clinical Chemistry. – 1990. – V. 36(10). – P.
1750-1755.
3. Kimoto E., Terada S., Yamaguchi T. Analysis of ascorbic acid, dehydroascorbic acid,
and transformation products by ion-pairing high-performance liquid chromatography with
multiwavelength ultraviolet and electrochemical detection. //Methods Enzymol. 1997. 279:
P. 3-12
4. Li X., Franke A.A. Fast HPLC-ECD analysis of ascorbic acid, dehydroascorbic acid
and uric acid. /J. Chromatogr. B. Analyt Technol Biomed Life Sci. 2009. V. 877(10). P.
853-856.
5. Khan M.I., Iqbal Z. Simultaneous determination of ascorbic acid, aminothiols, and
methionine in biological matrices using ion-pairing RP-HPLC coupled with
electrochemical detector. // J. Chromatogr. B. Analyt Technol Biomed Life Sci. 2011. V.
879(25). P. 2567-2575.
6. Iwata T. Determination of total ascorbic acid in human serum by high-performance
liquid chromatography with fluorescence detection //J. Chromatogr. A. 1985. – P. 351-355.
7. Spínola V., Mendes B., Câmara J.S., Castilho P.C. An improved and fast UHPLCPDA
methodology for determination of L-ascorbic and dehydroascorbic acids in fruits and
vegetables. Evaluation of degradation rate during storage. //Anal. Bioanal. Chem. 2012. V.
403(4). P. 1049-1058.
8. Gökmen V., Kahraman N., Demir N., Acar J. Enzymatically validated liquid
chromatographic method for the determination of ascorbic and dehydroascorbic acids in
fruit and vegetables. //J. Chromatogr. A. 2000. V. 881(1-2). P. 309-316.
9. Martí N., Mena P., Cánovas J.A., Micol V., Saura D. Vitamin C and the role of citrus
juices as functional food. //Nat. Prod. Commun. 2009. V. 4(5). P. 677-700.
10. VanderJagt M.S.; Philip J. Garry, Bhagavan Hemmige N. Ascorbic acid intake and
plasma levels in healthy elderly people. //J. Clin. Nutr. l987. V. 46. P. 290-294.
11. Jehl F., Gallion C., Monteil H. High-performance liquid chromatography of
antibiotics (review). //J. Chromatogr. - Biomed. Appl. 1990. V. 96. P. 509-548.
12. George Lynn and Louise C. Hellwig. Handbook of derivatization reactions for
HPLC. John Wiley & Sons. Inc. 1998.
13. Moeslinger T., Brunner M., Voif I. Spieckermann P. Spectrophotometric
Determination of Ascorbic Acid and Dehydroascorbic Acid. //Clin. Chem. 1995. V. 41(8).
P. 1177-1181.
14. Margolis Sam A. and Duewer David L. Measurement of ascorbic acid in human
plasma and serum: stability, intralaboratory repeatability, and interlaboratory
reproducibility. //Clinical Chemistry, 1996. V. 42(8). P. 1257-1262.
Опубликован
2019-11-20
Как цитировать
Dutov, A. A., Nikitin, D. A., Akhmetshina, A. M., Akhmetshina, O. M., Martynova, A. V., Sverkunova, A. V., Yermolina, A. V., Fedorova, E. N., Konovalova, O. N., Lukyanova, J. L., Mishchenko, M. N., & Semenova, A. N. (2019). ВЭЖХ анализ аскорбиновой кислоты в биологических жидкостях и некоторых пищевых продуктах. Сорбционные и хроматографические процессы, 13(3). извлечено от https://journals.vsu.ru/sorpchrom/article/view/1627
Выпуск
Том 13 № 3 (2013): Сорбционные и хроматографические процессы
Раздел
Статьи

Наиболее читаемые статьи этого автора (авторов)