Respiratory nitrate reductase from Thiothrix lacustris AS: purification, physic-chemical properties and catalytic characteristics
Keywords:
respiratory nitrate reductase, Thiothrix lacustris AS, purification.
Abstract
Respiratory nitrate reductase (E.C. 1.7.5.1) from bacterium Thiothrix lacustris AS cultivated under
anaerobic conditions in the presence of nitrate was isolated and purified 78-fold using a multistep purification
scheme including gel-filtration, ion-exchange chromatography, and preparative electrophoresis. The enzyme
was homogenous according to electrophoretic data, with activity of 97,7 U /mg. Kinetic and physicalchemical
characteristics of the enzyme (pH and temperature optima, thermostability, effect of different
inhibitors on activity) were studied.
Downloads
Download data is not yet available.
References
1. Blasco F., Iobbi C., Giordano G. et al. Nitrate reductase of Escherichia coli:
completion of the nucleotide sequence of the nar operon and reassessment of the role of
the a and b subunits in iron binding and electron transfer // Mol. Gen. Genet. 1989.
V. 218. P. 249-256.
2. Трубицын И.В., Андреевских Ж.Г., Юревич Л.И. и др. Способность к
нитратному дыханию как новый аспект метаболизма нитчатых серобактерий
рода Thiothrix // Микробиология. 2013. Т. 82. № 1. С. 19-26.
3. Armbruster E.H. Improvedtechniqueforisolationand identification of Sphaerotilus //
Appl. Microbiol. 1969. V. 17. P. 320-321.
4.Pfennig N.D., Lippert K.D. Uber das vitamin B12 – bedurfuisphototropher
Schwefelbakterien // Arch. Microbiol. 1966. V. 55. № 1. P. 245–256.
5. Murillo F.M., Gugliuzzo T., Senco J. et al. A heme C containing enzyme complex that
exhibits nitrate and nitrite reductase activity from the dissimilatory iron_reducing bacterium Geobacter metallireducens // Arch. Microbiol. 1999. V. 172.
P. 313-320.
6. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram
quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding // Analytical Biochem.
1976. V. 72. P. 248-254.
7. Рудаков О.Б., Востров И.А., Федоров С.В. и др. Спутник хроматографиста.
Методы жидкостной хроматографии. Воронеж. Водолей.2004. 528 с.
8. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of
bacteriophage T4 // Nature. 1970. V. 227. P. 680-685.
9. Покусаева В.О., Антипов С.С., Швырева У.С. и др. Суперпродукция, выделение
и очистка функционально активного бактериоферритина Dps E.coli // Сорбционные и
хроматографические процессы. 2012. Т.12. №6. C.1011-1017.
10. Рудакова Л.В., Селеменев В.Ф. Контроль качества и подлинности
фармацевтической продукции с использованием цифровых технологий. В кн.
«Проблемы аналитической химии» T. 16. «Фармацевтический анализ» - М.: Аргамак.
Медиa. 2013. С. 269-308.
11. Zumft W.G. Cell Biology and Molecular Basis of Denitrification // Microbiology
and molecular biology reviews. 1997. V. 61, № 4. P. 533-616.
12. Antipov A.N., Morozkina E.V., Sorokin D.Y. et al.Characterization of Molybdenum-
Free Nitrate Reductase from Haloalkalophilic Bacterium Halomonas sp. Strain AGJ 1-3 //
Biochemistry (Moscow). 2005. V. 70. .№ 7. P. 799-803.
completion of the nucleotide sequence of the nar operon and reassessment of the role of
the a and b subunits in iron binding and electron transfer // Mol. Gen. Genet. 1989.
V. 218. P. 249-256.
2. Трубицын И.В., Андреевских Ж.Г., Юревич Л.И. и др. Способность к
нитратному дыханию как новый аспект метаболизма нитчатых серобактерий
рода Thiothrix // Микробиология. 2013. Т. 82. № 1. С. 19-26.
3. Armbruster E.H. Improvedtechniqueforisolationand identification of Sphaerotilus //
Appl. Microbiol. 1969. V. 17. P. 320-321.
4.Pfennig N.D., Lippert K.D. Uber das vitamin B12 – bedurfuisphototropher
Schwefelbakterien // Arch. Microbiol. 1966. V. 55. № 1. P. 245–256.
5. Murillo F.M., Gugliuzzo T., Senco J. et al. A heme C containing enzyme complex that
exhibits nitrate and nitrite reductase activity from the dissimilatory iron_reducing bacterium Geobacter metallireducens // Arch. Microbiol. 1999. V. 172.
P. 313-320.
6. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram
quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding // Analytical Biochem.
1976. V. 72. P. 248-254.
7. Рудаков О.Б., Востров И.А., Федоров С.В. и др. Спутник хроматографиста.
Методы жидкостной хроматографии. Воронеж. Водолей.2004. 528 с.
8. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of
bacteriophage T4 // Nature. 1970. V. 227. P. 680-685.
9. Покусаева В.О., Антипов С.С., Швырева У.С. и др. Суперпродукция, выделение
и очистка функционально активного бактериоферритина Dps E.coli // Сорбционные и
хроматографические процессы. 2012. Т.12. №6. C.1011-1017.
10. Рудакова Л.В., Селеменев В.Ф. Контроль качества и подлинности
фармацевтической продукции с использованием цифровых технологий. В кн.
«Проблемы аналитической химии» T. 16. «Фармацевтический анализ» - М.: Аргамак.
Медиa. 2013. С. 269-308.
11. Zumft W.G. Cell Biology and Molecular Basis of Denitrification // Microbiology
and molecular biology reviews. 1997. V. 61, № 4. P. 533-616.
12. Antipov A.N., Morozkina E.V., Sorokin D.Y. et al.Characterization of Molybdenum-
Free Nitrate Reductase from Haloalkalophilic Bacterium Halomonas sp. Strain AGJ 1-3 //
Biochemistry (Moscow). 2005. V. 70. .№ 7. P. 799-803.
Published
2019-11-19
How to Cite
Trubitsin, I. V., Grabovich, M. Y., & Tutukina, M. N. (2019). Respiratory nitrate reductase from Thiothrix lacustris AS: purification, physic-chemical properties and catalytic characteristics. Sorbtsionnye I Khromatograficheskie Protsessy, 14(2). Retrieved from https://journals.vsu.ru/sorpchrom/article/view/1479
Section
Статьи
