Разделение изоформ L-лактатдегидрогеназы из галоалкалофильной бактерии Rhodovulum steppense штамма A-20s методом ионообменной хроматографии

  • Т. В. Сорокина студент, Воронежский государственный университет, Воронеж
  • В. М. Ларченков аспирант кафедры биохимии и физиологии клетки, Воронежский государственный университет, Воронеж
  • Х. А. Абдуллах аспирант кафедры биохимии и физиологии клетки, Воронежский государственный университет, Воронеж
  • Ж. А. Целуйко студент, Воронежский государственный университет, Воронеж
  • М. И. Фалалеева доцент кафедры биохимии и физиологии клетки, к.б.н., Воронежский государственный университет, Воронеж
  • А. Т. Епринцев профессор кафедры биохимии и физиологии клетки, заведующий кафедрой, д.б.н., Воронежский государственный университет, Воронеж
Ключевые слова: лактатдегидрогеназа, стадия очистки, ионообменная хроматография, электрофорез, изоформа, константа Михаэлиса

Аннотация

В результате многостадийной очистки, включающей гель-фильтрацию на сефадексе G-25 и ионообменную хроматографию на носителе DEAE-Sephacel, были получены ферментные препараты двух изоформ лактатдегидрогеназы (КФ 1.1.1.27) из галоалкалофильных бактерий Rhodovulum steppense штамма A-20s. При этом удельная активность изоформ составила 4.286 и 5.23 Е/мг белка соответственно. Относительная электрофоретическая подвижность в полиакриламидном геле каждой из изоформ лактатдегидрогеназы равнялась 0.329 и 0.714 соответственно. Определено для одной из изоформ значение константы Михаэлиса по NADH (0.014 мМ). Оптимальная для активности этой изоформы данного фермента область значений рН находится в районе 7.5.

Скачивания

Данные скачивания пока не доступны.

Литература

1. Larchenkov V.M., Ahmed A.H., Falaleeva M.I., Eprincev A.T., Organizacija i reguljacija fiziologo-biohimicheskih processov, 2014, No 16, pp. 85-88.
2.Eprintsev A.T., Falaleeva M.I., Stepanova I.Yu., Parfenova N.V., Biochemistry, 2003, Vol. 68, No 2, pp. 20-21.
3.Eprintsev A.T., Falaleeva M.I., Stepanova I.Yu. et al., Biology Bulletin, 2003, No 3, pp. 301-310.
4. Selemenev V.F., Rudakov O.B., Slavinskaya G.I., Drozdov N.V., Pigmentyi pischevyih proizvodstv, M.: DeLee print, 2008, 246 p.
5.Ostendorp R., Auerbach G., Jaenicke R., Protein Sci., 1996. pp. 862-873.
6.Taguchi H., Machida M., Matsuzawa H., Otha T., Agric Biol Chem., 1985, Vol. 49, pp. 359-365.
7.Flores H., Ellington A.D., Protein Eng. Des. Sel, 2005, Vol. 18, pp. 369-377.
8.Garvie E.I., Microbiol Rev, 2007, Vol. 44, No 1, pp. 106-39.
9.Caspar P., Neves A.R., Shearman C.A. et al., FEBS J., 2007, Vol. 274, No 22, pp. 5924-36.
Опубликован
2018-02-20
Как цитировать
Сорокина, Т. В., Ларченков, В. М., Абдуллах, Х. А., Целуйко, Ж. А., Фалалеева, М. И., & Епринцев, А. Т. (2018). Разделение изоформ L-лактатдегидрогеназы из галоалкалофильной бактерии Rhodovulum steppense штамма A-20s методом ионообменной хроматографии. Сорбционные и хроматографические процессы, 15(5), 714-719. https://doi.org/10.17308/sorpchrom.2015.15/325